بررسی بیان ژن گاما گلوبین با کاهش پایدار بیان ژن mbd2 توسط سیستم لنتی ویروسی در رده سلولی k562
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم بهزیستی و توانبخشی
- نویسنده jسمانه فراشی
- استاد راهنما مهدی بنان
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1389
چکیده
پروتئین mbd2یکی از مهار کنند ه های ژن گاما گلوبین است.مکانیسم این مهار ناشناخته می باشد.با توجه به بیان ژن گاما گلوبین و پروتئین mbd2در رده سلولی k562،ما از این سلول ها به عنوان سیستم مدل استفاده کردیم.ابتدا پنج کلون لنتی ویروسی حاوی shrna-mbd2در سلول های 293tتست شدند،به این ترتیب که لنتی وکتور های plko.1به همراه shrna-mbd2به صورت گذرا به درون سلول های293tترانسفکت شدند و از اسکلت وکتور plko.1 به عنوان کنترل منفی استفاده شد. چهار کلون کاهش بیان ژن mbd2 را نشان دادند که ما برای ادامه کار دو shrnaرا که بیشترین کاهش را داشتند انتخاب نمودیم.سلول های k562با استفاده از سیستم لنتی ویروسی و روش آلوده سازیco-culture ترنسدیوس شدند.نتیجه اولیه میزان بالایی از کاهش بیان ژن mbd2را نشان داد.همچنین با توجه به مطالعات گذشته مبنی بر القای بیان ژن گاما گلوبین همزمان با کاهش بین ژن mbd2، ما انتظار افزایش قابل توجهی را در بیان ژن گاما گلوبین داشتیم. با تولید رده ی سلولی با کاهش بیان پایدار ژن mbd2 (حدود 70%)،بیان ژن گاماگلوبین حدود 11 برابر افزایش داشت.
منابع مشابه
بیان القایی ژن گزارشگرGFP در رده سلولی LMH با استفاده از ناقلین لنتی ویروسی القا پذیر
هدف: با تلفیق سیستم االقایی تتراسیکلین (Tet-inducible system) و ناقلین لنتی ویروسی، القا بیان ژن گزارشگر Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) در سلول‌های پرندگان مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روشها: ژن EGFP تحت کنترل سیستم Tet-ON قرار گرفت و بیان آن در سلول‌های کبدی جوجه رده LMH بررسی شد. ابتدا باکتریهای مستعد با ناقل لنتی ویروسی القایی حامل EGFP بههمر...
متن کاملبیان القایی ژن گزارشگرgfp در رده سلولی lmh با استفاده از ناقلین لنتی ویروسی القا پذیر
هدف: با تلفیق سیستم االقایی تتراسیکلین (tet-inducible system) و ناقلین لنتی ویروسی، القا بیان ژن گزارشگر enhanced green fluorescent protein (egfp) در سلول‌های پرندگان مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روشها: ژن egfp تحت کنترل سیستم tet-on قرار گرفت و بیان آن در سلول های کبدی جوجه رده lmh بررسی شد. ابتدا باکتریهای مستعد با ناقل لنتی ویروسی القایی حامل egfp بههمراه یک ناقل دوم که فعال کننده tet (t...
متن کاملهمسانهسازی و بیان ژن نوترکیب CD40Lانسانی در رده سلولی HEK293
چکیده سابقه و هدف CD40L ، پروتئینی غشایی و یکی از اعضای خانواده TNF است که نقش مهمی در انتقال پیام سلولی در ایمنی ذاتی و تطبیقی دارد. از آن جایی‌که این پروتئین نقش خود را از طریق تجمع گیرنده در سطح سلول هدف ایفا می‌کند، به نظر می‌رسد فرم مالتی‌‌مری آن بتواند اثر قوی‌تری نسبت به فرم طبیعی ترایمری ایجاد کند. بر این اساس در این مطالعه کلونینگ و بیان فرم کایمری و دودکامری CD40L محلول، از طریق پر...
متن کاملتأثیر سنتز نانولیپوزوم پگیله حاوی DNAi در کاهش بیان ژن BCL-2 رده سلولی DLCL2
زمینه و هدف: لنفوم غیرهوچکین از بیماریهای شایع با منشأ سلول‌های لنفاوی می‌باشد. این مطالعه با هدف بررسی میزان اثرگذاری نانولیپوزوم‌های پگیله حاوی DNAi (داروی آنتی‌سنس) بر کاهش میزان بیان ژن BCL-2 انجام شد. روش بررسی: در این مطالعه، برای تهیه نانولیپوزوم پگیله حاوی DNAi، سه فرمولاسیون با ترکیب‌های 5، 10 و 15% ازPEG 2000 و نسبت‌های مشخصی از فسفولیپیدها و کلسترول تهیه شد. پس از خالص‌سازی با استف...
متن کاملتاثیر هارمالین بر بیان ژن Dnmt1 و هیپومتیلاسیون پروموتور ژن P15 در رده سلولی لوسمیک NB4
چکیده سابقه و هدف متیلاسیون DNA در ناحیه پروموتر ژنهای سرکوبگر تومور از جمله P15 ، به عنوان یکی از مهمترین مکانیسمهای ایجاد بدخیمیهای خونی مطرح است .هارمالین یکی از آلکالوئیدهای مشتق شده از گیاه اسپند است که دارای خاصیت آنتیپرولیفراتیو بر روی رده‌های سلولی لوسمیک می‌باشد. در این مقاله تاثیر هارمالین بر کاهش بیان ژنDnmt1 و هیپومتیلاسیون ناحیه پروموتر ژن P15 در رده سلولی NB4 مورد بررسی قرا...
متن کاملبررسی مهار بیان ژن رپرسور گاماگلوبین با روش RNAi در رده سلولی اریتروئیدی 562 K با هدف ژن درمانی بتاتالاسمی
سابقه و هدف: بتاتالاسمی از بیماریهای ژنتیکی است که سبب کم‌خونی حاد در افراد مبتلا می‌شود. یکی از روشهای درمان بتاتالاسمی، القای ژن گاماگلوبین جنینی است. کمپلکس پروتئینی DRED از رپرسورهای گاماگلوبین است که از دو زیر واحد متصل شونده به DNA، به نام 2 TRو 4TR تشکیل شده است. یک روش جالب جهت افزایش بیان گاماگلوبین، مهار بیان 4TR توسط مولکول‌های siRNA می‌باشد. هدف از این تحقیق، راه‌اندازی سیستم RNAi ب...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم بهزیستی و توانبخشی
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023